شناسایی و تعیین تنوع ژنتیکی گونه های مولد آفلاتوکسین در پسته با استفاده از مارکر مولکولی rapd

پسته یکی از مهمترین محصولات کشاورزی کشور ایران است. این محصول همواره مورد حمله گونه های آسپرژیلوس مولد آفلاتوکسین aspergillus flavus و a. parasiticus قرار می گیرد. این توکسین برای سلامتی انسان و حیوانات مضر می باشد. هدف از این مطالعه ردیابی و تعیین تنوع ژنتیکی گونه های مولد آفلاتوکسین در پسته های انباری استان کرمان می باشد. جدایه های آسپرژیلوس از میوه های پسته جدا سازی شده و سپس خالص سازی و شناسایی شدند. برای تعیین نوع و میزان آفلاتوکسین در این گونه ها از روش کروماتوگرافی مایع با فشار زیاد (hplc) استفاده شد. برای تعیین گونه های مولد آفلاتوکسین از واکنش زنجیره ای پلیمراز pcr استفاده شد. از جفت پرایمر طراحی شده برای ژن ناظر آفلاتوکسین aflr در تست pcr برای تعیین گونه های مولد آفلاتوکسین استفاده شد. تمامی جدایه های a. flavus و a. parasiticus به پرایمر های طراحی شده برای ژن ناظر آفلاتوکسین واکنش مثبت نشان دادند. همان گونه که انتظار می رفت با این جفت آغازگر یک قطعه dna به اندازه bp798 تکثیر شد. تنها جدایه ay28 به پرایمر های مورد نظر تکثیر نشان نداد. این جدایه قادر به تولید آفلاتوکسین در محیط کشت نیز نبود. روش pcr برای تعیین گونه های مولد آفلاتوکسین در مقایسه با سایر روشها، روشی حساس، سریع و اختصاصی می باشد. نشانگر rapd برای تعیین تنوع ژنتیکی در گونه های آسپرژیلوس مولد آفلاتوکسین به کار برده شد. در این روش، نشانگر rapd بین یک جدایه غیر مولد توکسین و سایر جدایه های مولد توکسین تمایزی ایجاد نکرد، اما توانست گونه های . flavus aو a. parasiticus را از هم تفکیک کند.